小麦面粉Puroindoline蛋白的提取与纯化
王珏,罗立廷,陈明洁,李洋,张金锐,何光源
摘要:Puro indo line蛋白是小麦面粉中一种非常重要的蛋白质,不仅影响和决定了籽粒的硬度,而且有抗G+、G-菌以及抗真菌的作用。用含4%T riton X-114、100 mm o l/L pH 7.8 T ris-HC l缓冲液处理小麦面粉来分离Puro indo-line蛋白,经处理后得到的蛋白质混合溶液首先用分子筛葡聚糖G-75纯化,每个收集管内的组分经SDS-PAGE分析,分子量小于31 kD的蛋白质组分被回收和集中,回收的蛋白质组分经PEG 20000浓缩后,再用离子交换柱羧甲基纤维素(CM-23)进行纯化。其洗脱液分别是双蒸水和N aC l,梯度为0.05~0.7 m o l/L、8 mm o l/L pH 5.5的M ES缓冲液,回收只含15 kD的蛋白质的组分,接着用PEG 20000浓缩,最后冷冻干燥得到Puro indo line蛋白。
Link: http://xueshu.baidu.com/s?wd=paperuri%3A%28629e8c34fff8abf07034de3463787639%29&filter=sc_long_sign&tn=SE_xueshusource_2kduw22v&sc_vurl=http%3A%2F%2Fkns.cnki.net%2FKCMS%2Fdetail%2Fdetail.aspx%3Ffilename%3Dwzxy200506013%26dbname%3DCJFD%26dbcode%3DCJFQ&ie=utf