基因枪法获得优质 HMW 亚基基因表达的转基因小麦

施农农 ，何光源 ，李克秀 ，Jones H. D.，Shewry P. R.

摘要：为探讨利用基因工程技术进行小麦品质改良的可行性,用基因枪法对湖北省 3 个小麦品种鄂恩 1 号、鄂麦 11 号和鄂麦 12 号分别进行优质高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)基因 1Ax1 和 1Dx5+1Dy10 的转导。试验结果表明，经基因枪轰击的幼胚外植体的再生频率和转化频率明显比幼穗高；基因型间愈伤组织再生能力和转化频率的差异，直接影响着小麦转化的成功率；3 个品种的幼胚发育时期与其再生频率均呈显著负相关（ r =-0.93 或-0.95）；在可控环境条件下，花后 12～14 d 的供试植株幼胚的转化频率最高（鄂恩 1 号、鄂麦 11 号和鄂麦 12号分别为 4.5%、 2.9%和 2%）。 研究表明， 鄂恩 1 号、 鄂麦 11 号适龄期的幼胚试材,用等摩尔比的优势亚基基因 1Dx5和 1Dy10 与选择标记基因以 2：1 摩尔比混合的沉淀物包裹金粉，经 600～900 psi 氦气压轰击后，在含 0.5 mg·L-12,4-D 的 MS 培养基中诱导愈伤、含 0.1 mg·L-1 2,4-D 和 5 mg·L-1 玉米素的 R 培养基中分化、3mg·L-1 L-PPT 选择压下继代分化筛选，可获得稳定可育的 T0 代转基因植株以及胚乳特异性表达的 T1 代转基因种子。

Link:

http://kreader.cnki.net/Kreader/CatalogViewPage.aspx?dbCode=CJFQ&filename=ZNYK200505002&tablename=CJFD2005&compose=&first=1&uid=WEEvREcwSlJHSldRa1FhdkJkcGp4VVh4ZG1lU0l4WHA3aEpra0dsamVCdz0=$9A4hF_YAuvQ5obgVAqNKPCYcEjKensW4ggI8Fm4gTkoUKaID8j8gFw!!