高大山羊草 Aegilops longissima puroindoline b 基因的克隆与表达分析

陈明洁 ,方倜 ,李克秀 , 张常娥 ,方斌 ,唐涛 ,何光源

摘要: 籽粒硬度是小麦加工品质的重要影响因素。 puroindoline a( Pina)和 puroindoline b( Pinb)是控制小麦籽粒硬度的主效基因。 根据已报导的小麦 Pinb 基因的保守序列, 设计合成了一对特异性引物, 对高大山羊草 Aegilops longissima( SS)的基因组 DNA 和胚乳 RNA 进行 Pinb 基因扩增、克隆、序列测定和表达分析, 发现了一个新型 Pinb 等位基因。 基因长 360bp, 编码 119 个氨基酸残基, 对应于麦类作物 Puroindoline B( PinB) 成熟蛋白的结构区域, 具有麦类作物 Pinb 基因特有的 WPTKWWK 的色氨酸结构域基因序列和 10 个半胱氨酸所形成的 5 个二硫键结构。 与软粒小麦 cv. Capitole 的 Pinb -D1a 相比较, 其核苷酸和氨基酸同源性分别为93 . 3%和 92 . 4%。 RT-PCR 证实了 Pinb 基因在籽粒胚乳中的表达。研究结果表明, 高大山羊草中包含着与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因, 为栽培小麦品质改良提供了丰富的遗传资源。

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