粘果山羊草（Aegilops kotschyi）puroindoline b基因的克隆与表达分析

陈明洁，方倜，虞斌，张金锐，杨广笑，何光源

摘要：籽粒硬度是小麦加工品质的重要影响因素。puroindoline a（Pin a）和puroindoline b（Pin b）是控制小麦籽粒硬度的主效基因。根据已报导的小麦Pin b基因的保守序列，设计合成了一对特异性引物ForB1与RevB1，对粘果山羊草（Aegilops kotschyi，C^uM^k）的三个材料的基因组DNA和胚乳cDNA进行Pin b基因扩增、克隆、序列测定和表达分析，发现了4个新型Pin b等位基因，基因序列与六倍体小麦的同源基因存在较大的差异。与软粒小麦品种Capitole的Pinb—D1a相比较，其核苷酸同源性分别为93．3％、94．6％、94．6％、94．4％,氨基酸同源性分别为90．5％、93．2％、93．2％、92．6％。其ORF长447bp，编码148个氨基酸残基，都具有麦类作物Pinb基因特有的19个氨基酸的信号肽序列和WPTKWWK的色氨酸结构城。等位基因Pin b-11-1含有1个紧邻色氨酸结构城的突变位（Val66Phe）。RT—PCR证实了Pin b基因在籽粒胚乳中的表达。Southern blot分析结果显示，三种材料均含有两个拷贝的Pin b基因。研究结果表明，粘果山羊草中包含与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因，为栽培小麦的品质改良提供了丰富的基因资源。

Link：http://vip.hbdlib.cn/qk/96016B/20062/21564572.html

Doi：10.3969/j.issn.1009-1041.2006.02.001