拟南芥psy基因cDNA的克隆及其植物表达载体的构建

姚琴 丛玲 罗立延 陈明洁 汪越胜 杨广笑 何光源

摘要：为了获得胚乳组织特异性表达八氢番茄红素的转基因小麦，以拟南芥幼叶RNA为模板，由特异型引物通过RT—PCR一步法得到大小约为1．3kb的基因片段。将此片段连接在克隆载体pMm8-T进行测序，结果表明，该基因片段为八氢番茄红素合成酶基因（psy）cDNA片段。将psy基因片段正向插入植物表达载体pLRPT中高分子量麦谷蛋白亚基基因1Dx5启动子与nos终止子之间，pLRPT载体无1Dx5基因开放阅读框，运用菌落PcR对重组子进行筛选与鉴定，说明拟南芥psy基因已正确插入pLRPT，成功构建了植物表达载体pLRPTPSY。

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DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2006.01.003