α-2b干扰素重组质粒的建立及在毕赤酵母中的表达

丁鹏，方斌 ，梁布 ，何光源

摘要：采用基因工程手段构建基因工程菌表达a-2b干扰素。

方法：根据毕赤酵母密码子嗜好性原理设计并合成a-2b干扰素基因序列，将其插入到毕赤酵母pichia pastoris的分泌型表达质粒pPIC9K中，得到重组分泌表达质粒pPICgK-IFNQ- 2b，并用电转化法转化P pastoris GSll5。筛选出整合型His⁺ Mur⁺菌株，进一步用G418筛选获得高拷贝转化子，经5d诱导表达后 SDS-PAGE检测。

结果：菌落PCR和序列测定结果显示重组表达质粒已成功构建，SDS—PAGE结果显示目的蛋白已成功表达。

结论：在毕赤酵母中成功表达a-2b干扰素。

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