Bar表达框基因载体高频转化栽培小麦
施农农 ,何光源 ,李克秀,王慧中
摘要:为探讨无载体主干序列(细菌DNA)的表达框基因直接转化栽培小麦的可行性和有效性,对栽培小麦(Triticum aestivum L.)进行了bar表达框基因的基因枪转化.通过试材培养、外植体分离、bar 表达框基因分离提取和纯化、基因枪轰击、诱导分化与再生培养、再生苗核酸抽提、转基因检测及除草荆 涂抹试验等方法,筛选到23株全部来自幼胚愈伤的独立再生苗,其中18株显示bar表达框基因的整合,且均表现抗除草荆效应.基因型鄂麦12号的转化频率(1.55 )高于鄂恩1号(O.87 ),两基因型在 1100 psi轰击压下的转化频率均高于900 psi,其中鄂麦12号达到3.51 ,明显优于鄂恩1号,且高于常规小麦基因抢的平均转化频率0.50 ~1.00 .鄂麦12号幼胚在1100 psi轰击压下转化bar表达框基 因可获高转化效应.表明受体基因型、外植体类型、轰击压等因素在优化表达框基因转化体系中具重要作用.推断表达框基因转化方法具有片段小、环境安全、转化效率高、整合模式简单、表达高效等优势,在 作物遗传转化中具有广泛应用前景.
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