种子特异性表达孢子欧文氏菌crtB基因的植物表达载体构建

刘慧娟, 郎君, 冯志国, 何光源

（华中科技大学生命科学与技术学院 分子生物物理教育部重点实验室, 武汉 430074）

摘要：利用PCR技术扩增出tp和crtB基因，胶回收后分别连接到pMD18-T载体测序。tp和crtB基因经酶切回收后通过pBlue-script KS质粒连在一起构建成pSK-tp-crtB，通过BamHⅠ和SacⅠ酶切，从pSK-tp-crtB载体上切下目的基因片段tp-crtB，替换pBI121-napA载体中的GFP基因，构建了tp-crtB基因在植物种子中特异性表达的载体pBI121-tpcrtB。转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α。测序鉴定后将阳性质粒转化农杆菌感受态细胞EHA105，经菌液和质粒PCR分析，获得了真核表达载体pBI121-tp-crtB，为crtB基因功能的进一步研究奠定基础。

关键词：crtB基因; 根癌农杆菌; 遗传转化; 植物表达载体

Link: http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical/swjstb200901021

Doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2009.01.013